名稱：MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 貨號：M1020
規(guī)格：500T/1000T
保存：MTT 溶液-20℃保存；Formazan溶解液室溫或-20℃保存。
產品內容：
500T 1000T
MTT 溶液 5ml 5ml×2
Formazan 溶解液 60ml 60ml×2
產品簡介：
MTT 可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan。在特定溶劑存在的情況下，可
以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定490nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞
毒性越大，則吸光度越低。
使?說明：
1.收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，分于96 孔板，每孔180μl，3000-10000 個細胞/孔。
2.置37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁，培養(yǎng)6-24 小時。
3.加入適當濃度的受試化合物，繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清，加入90μl 新鮮培養(yǎng)液，再加入10ul MTT 溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。
5.然后吸掉上清，每孔加入110ul Formazan 溶解液，置搖床上低速振蕩10 min，使結晶物充分溶解。在酶
聯免疫檢測儀490 nm 處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調零孔（培養(yǎng)基、MTT、 Formazan 溶解液），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養(yǎng)
液、MTT、 Formazan 溶解液），每組設定3 復孔。
注意事項：
1.由于使用96 孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96 孔板周
圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96 孔板置于
靠近培養(yǎng)箱內水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2.MTT 溶液為黃色需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。Formazan 溶解
液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
|
點擊放大
